Диагностика TORCH-инфекций (токсоплазмоз, краснуха, цитомегаловирусная инфекция, герпес). Лабораторная диагностика. Лекция для врачей
Лекция для врачей "Диагностика TORCH-инфекций (токсоплазмоз, краснуха, цитомегаловирусная инфекция, герпес). Лабораторная диагностика" (отрывок из книги "Герпесвирусные инфекции человека: руководство для врачей" - Исаков В. А., Архипова Е. И.)
Новые технологии лабораторной диагностики вирусных и бактериальных инфекций
Диагностика TORCH-инфекций
В 1971 г. ВОЗ объединила наиболее опасные врожденные инфекции в TORCH-комплекс — группу внутриутробных инфекций, вызывающих стойкие структурные изменения плода (Kinney J. S., Kumar М. L., 1988). Как правило, в группу TORCH-инфекций включают следующие заболевания: Т — токсоплазмоз (toxoplasmosis'), О — другие инфекции (others), R — краснуху (rubella), С — цитомегаловирусную инфекцию (cytomegalovirus), Н — герпес (herpes simplex virus). В «другие инфекции» включают влияющие на плод инфекции — хламидиоз и гепатиты В и С (Imura S., 2000). Недавно в этот перечень включена и ВИЧ-инфекция (Gerber S., Hohfeld Р„ 2003).
Опасность первичного заражения TORCH-инфекциями в период беременности состоит в том, что, протекая бессимптомно, они могут оказывать пагубное действие на все системы и органы плода, особенно на его центральную нервную систему, повышают риск выкидыша, мертворождения и врожденных уродств ребенка, формирования пороков его развития, вплоть до инвалидности.
Новая медицинская технология — «Быстрые простые методы в диагностике заболеваний TORCH-комплекса» — зарегистрирована Минздравсоцразвития (регистрационное удостоверение № ФС-2006/002) (Ткаченко С. Б. [и др.], 2006). Этот документ регламентирует деятельность лаборатории в соответствии со стандартами и требованиями Минздравсоцразвития при использовании данной технологии в практике исследований пациентов на TORCH-инфекции. Технология экспресс-диагностики TORCH-инфекций основана на применении унифицированной схемы анализа сыворотки, плазмы или цельной крови пациента для обнаружения маркеров широкого спектра врожденных* инфекций.
Для ускорения лабораторных исследований и снижения расходов на оборудование были выбраны высокотехнологичные бесприборные иммуноферментные тесты ИммуноКомб (производств фирмы Orgenics, входящей в корпорацию Alere Inc, США). Тесты ИммуноКомб сочетают достоинства классического ИФА — высокую специфичность и чувствительность с простой и быстрой процедурой постановки анализа. Методика не требует дополнительного оборудования, ИммуноКомб содержит все необходимые для проведения анализа реагенты. В состав набора ИммуноКомб входят 3 пластиковых гребня с нанесенными антигенами или антителами, являющимися твердой фазой, 3 проявочные ванны, заполненные всеми необходимыми реагентами, положительный и отрицательный контроли. В состав наборов для визуального количественного определения титра антител входит цветная шкала КомбСкейл.
При проведении анализа сыворотку, плазму или цельную кровь человека (10—50 мкл, в зависимости от выявляемой инфекции) вносят в ячейки ряда А проявочной ванны и приводят ее в контакт с твердой фазой — гребнем. Затем гребень переносят из ряда в ряд проявочной ванны и через 40 мин получают результат в виде окрашенных точек. Результат учитывается визуально или автоматизированно на приборе КомбСкан. При визуальном учете уровень видоспецифических антител оценивается с помощью калибровочной шкалы КомбСкейл. В тесте предусмотрен внутренний контроль (верхняя точка), подтверждающий достоверность проведенного анализа и сохранность реагентов во время транспортировки и хранения. Все наборы ИммуноКомб рассчитаны на 36 определений. Для индивидуального тестирования гребень можно согнуть и отломить необходимое количество зубцов. При этом в проявочной ванне вскрывается только необходимое количество ячеек (соответствующее числу зубцов). Невскрытые ячейки и неиспользованные зубцы хранятся в течение срока годности тест-системы.
Технология ИммуноКомб разработана Парижским институтом Пастера (Франция), запатентована фирмой Орженикс и не имеет аналогов в мире. В технологии ИммуноКомб учтены особенности появления первых антител, которые отличаются от антител, полученных позднее, во время задержанного иммунного ответа (различные изотипы синтезированных антител, различная аффинность и авидность, направленность на различные эпитопы антигенов). Разработаны и подобраны модификации ИФА, обеспечивающие достоверное выявление конкретной инфекции: непрямой метод твердофазного ИФА использован для выявления IgG и IgA антител к Chiamydia trachomatis и Chlamidia pneumoniae, IgG и IgM — к токсоплазме, цитомегаловирусу, вирусам краснухи, гепатита С, IgG антител — к ядерному антигену вируса гепатита В, антител к ВИЧ 1 и 2 типа; «сандвич»-вариант применен для определения поверхностного антигена вируса гепатита В; метод двойного распознавания выбран для выявления IgM антител к ядерному антигену вируса гепатита В; метод иммунного захвата оптимален для обнаружения IgG и IgM к вирусу гепатита А. На твердую фазу — гребень — иммобилизованы инактивированные антигены или антитела, подвергнутые дополнительным патентованным методам очистки. Это позволяет избежать перекрестных реакций, отследить появление первых антител и выявить раннюю стадию заболевания. Для обеспечения высокой чувствительности тестов ИммуноКомб применяется реакция связывания с использованием фосфатазно-щелочного конъюгата. Французское агентство по контролю за медикаментами (ADA), оценивая тесты, разрешенные для использования в клиниках Европы, подчеркивает, что использование фосфатазно-щелочного конъюгата позволяет достичь наиболее высокой чувствительности по сравнению с тестами, основанными на пероксидазной реакции. Большинство иммуноферментных планшетных тест-систем российских производителей основаны на пероксидазной реакции. Тесты ИммуноКомб воспроизводят полноценный иммуноферментный анализ без использования оборудования. Чувствительность и специфичность их со-ответствуют показателям планшетного ИФА (ELISA) признанных международных производителей, в то время как чувствительность и специфичность иммунохроматографических экспресс-тестов значительно ниже планшетного ИФА (ELISA), что было подтверждено испытаниями ВОЗ и Государственными сравнительными испытаниями в Российской Федерации (Ткаченко С. Б. [и др.], 2006).
Алгоритм диагностики TORCH-инфекций основан на обнаружении специфических антител классов М, А и G к возбудителю инфекции. Часто сам возбудитель из-за сложности взятия его для анализа не может быть определен. Например, при хронической форме возбудитель хламидийной инфекции или его антигенные и нуклеиновые компоненты могут не выявляться в нижних половых путях. Chlamydia trachomatis поглощается периферическими моноцитами, распространяется и оседает в различных органах и тканях организма человека, сохраняясь там в течение длительного времени, что обычно приводит к развитию восходящей персистирующей формы инфекции, которая обусловливает хроническое течение болезни. При этом время от времени происходит высвобождение антигенов Chlamydia trachomatis из клеток, которое приводит к индуцированию гуморального ответа и накоплению специфических сывороточных антител, выявляющихся серологическими исследованиями. Обычно имеет место высокая корреляция между уровнем IgA антител к Chlamydia trachomatis и фактическим наличием хламидийного антигена. Поэтому для выявления TORCH-инфекции выбран серологический метод, который позволяет осуществлять диагностику даже в тех случаях, когда физический доступ к очагу инфекции затруднен.
При скрининге на TORCH-инфекции с помощью тестов Иммуно- Комб возможно проведение анализа образцов на наличие антител класса IgM, IgA, IgG к соответствующему возбудителю, в том числе количественных анализов на наличие антител класса IgG. Для уточнения стадии заболевания анализируются парные сыворотки. Наличие низких уровней IgG к возбудителю в сыворотке человека должно рассматриваться как ранее перенесенная инфекция или проведенная терапия антибиотиками (антитела в крови могут сохраняться до 3—6 мес. после излечивания). Существенное нарастание титра антител класса G в парных сыворотках (в 4—8 раз от первоначального уровня) свидетельствует об активной фазе инфекции. В этом случае следует провести параллельное исследование на наличие антител класса М или класса А. Высокий уровень антител класса М или А подтверждает активное течение инфекции или рецидив заболевания.
Данная технология может использоваться во всех без исключения лечебно-профилактических учреждениях стационарного и амбулаторно-поликлинического типа, включая первичное звено здравоохранения, выездные кабинеты.
Дополнительный материал к лекции
Опоясывающий герпес. Симптомы и лечение
Купить медицинскую литературу по акушерству, гинекологии, дерматовенерологии, офтальмологии, педиатрии, терапии, иммунологии, вирусологии в интернет-магазине медицинской книги shopdon.ru
Книга "Герпесвирусные инфекции человека: руководство для врачей"
Автор: Исаков В. А., Архипова Е. И.

В книге освещены вопросы эпидемиологии, иммунопатогенеза и патоморфологии, клинической картины и лабораторной диагностики, основные принципы комплексной терапии и профилактики больных герпесвирусными инфекциями (в том числе генитальным герпесом, офтальмогерпесом) с поражением различных органов и систем.
Подробно изложены вопросы влияния герпетической инфекции на беременность, плод и новорожденного, тактика ведения беременных с герпесом. Изложены особенности клиники и лечения, классификация простого герпеса у лиц с иммунодефицитными состояниями.
Дана информация о новых противовирусных, иммунотропных средствах и вакцинах, применяемых для лечении больных герпесвирусными инфекциями. Показана эффективность системной энзимотерапии в комплексном лечении вирусно-бактериальных инфекций урогенитального тракта.
Руководство предназначено для акушеров-гинекологов, дерматовенерологов, инфекционистов, офтальмологов, педиатров, терапевтов, клинических иммунологов и вирусологов, научных сотрудников, врачей общей практики, аспирантов, клинических ординаторов, интернов и студентов медицинских вузов.
Купить медицинскую литературу по акушерству, гинекологии, дерматовенерологии, офтальмологии, педиатрии, терапии, иммунологии, вирусологии в интернет-магазине медицинской книги shopdon.ru
Содержание книги "Герпесвирусные инфекции человека: руководство для врачей" - Исаков В. А.
Глава 1. Этиология. Характеристика герпесвирусов
1.1. Классификация вирусов герпеса
1.2. Структура вирусов герпеса
1.3. Характеристика представителей семейства герпесвирусов
Глава 2. Эпидемиология герпесвирусных инфекций
2.1. Источник герпетической инфекции и механизмы ее передачи
2.2. Восприимчивость человека к герпетической инфекции и показатели заболеваемости
Глава 3. Патогенез и иммунология герпесвирусных инфекций
3.1. Механизмы репродукции вирусов герпеса
3.2. Цитомегаловирусная инфекция
3.3. Вирус ветряной оспы — опоясывающего герпеса
3.4. Новые сведения об иммунопатогенезе герпесвирусных инфекций
3.5. Молекулярные механизмы уклонения вирусов от иммунной атаки
3.6. Молекулярные механизмы модуляции активности естественных киллеров вирусами
Глава 4. Лабораторная диагностика герпесвирусных инфекций
4.1. Современные методы диагностики герпесвирусных инфекций
4.2. Новые технологии лабораторной диагностики вирусных и бактериальных инфекций
4.2.1. Диагностика TORCH-инфекций
4.2.2. Тест-системы ЗАО «ЭКОлаб» для диагностики простого герпеса и цитомегаловирусной инфекции
4.3. Персонализированная терапия урогенитальных инфекций
4.4. Применение проточной цитофлуорометрии для оценки фагоцитарной активности нейтрофилов
4.5. Лабораторная диагностика ЦМВ-инфекции у реципиентов почечного трансплантата
4.6. Клинико-этиологические особенности моно- и смешанных микоплазменных инфекций урогенитального тракта
4.7. Рекомендации по забору и транспортировке образцов клинического материала
4.8. Основные коммерческие тест-системы для диагностики герпесвирусных инфекций
Глава 5. Клинические проявления герпесвирусных инфекций
5.1. Инфекции, обусловленные вирусами простого герпеса
5.2. Клиника герпесвирусных инфекций
5.3. Опоясывающий герпес
5.4. ВЭБ-инфекция
5.5. Инфекция ВГЧ-6 и ВГЧ-7
5.6. Инфекция, ассоциированная с ВГЧ-8
5.7. Мезенхимальная дисплазия, остеохондроз позвоночника и герпетическая инфекция. Новый взгляд на этиопатогенез клапанных пороков сердца
5.8. Урогенитальный герпес
5.8.1. Клинико-иммунологическая характеристика рецидивирующего генитального герпеса
5.8.2. Инаппарантные (бессимптомные) формы генитального герпеса
5.8.3. Клинико-иммунологические особенности атипично протекающей герпетической инфекции при невынашивании в первом триместре беременности
Купить медицинскую литературу по акушерству, гинекологии, дерматовенерологии, офтальмологии, педиатрии, терапии, иммунологии, вирусологии в интернет-магазине медицинской книги shopdon.ru
Глава 6. Герпетическая инфекция глаз (офтальмогерпес)
6.1. Патогенез офтальмогерпеса
6.2. Клинические формы офтальмогерпеса
6.3. Лечение офтальмогерпеса
Глава 7. Герпесвирусы и репродуктивное здоровье человека
7.1. Значение герпесвирусов в этиологии бесплодия
7.1.1. Герпесвирусы и мужское бесплодие
7.1.2. Роль мужского фактора в вертикальной передаче герпесвирусов
7.1.3. Герпесвирусы и женское бесплодие
7.2. Герпесвирусы и беременность
Глава 8. Герпес у лиц со сниженным иммунным статусом
8.1. Герпес у ВИЧ-инфицированных и больных СПИДом
8.2. Герпес у онкогематологических больных
8.3. Особенности герпетической инфекции у больных гриппом и ОРЗ
Глава 9. Лечение герпесвирусных инфекций
9.1. Общие принципы терапии вирусных инфекций
9.2. Этапное лечение и диспансеризация больных рецидивирующим герпесом
9.3. Эффективность комплексной терапии тяжелых форм ГГ с монотонным типом рецидивирования
9.4. Терапия генитального герпеса у беременных
9.5. Лечение герпеса у лиц со сниженным иммунным статусом
9.6. Терапия опоясывающего герпеса и синдрома постгерпетической невралгии
9.7. Лечение бактериальных инфекций, сопутствующих генитальному герпесу
9.7.1. Клинико-иммунологическая характеристика больных с вирусно-бактериальными инфекциями УГТ
9.7.2. Общие рекомендации при лечении больных урогенитальным хламидиозом
9.7.3. Общие рекомендации при лечении гарднереллеза, микоплазмоза (уреаплазмоза) и трихомониаза
9.8. Этиотропная терапия хронического урогенитального хламидиоза
Глава 10. Системная энзимотерапия в комплексном лечении урогенитальных инфекций
10.1. Препараты системной энзимотерапии
10.2. Фармакологические свойства препаратов системной энзимотерапии
10.3. Показания и противопоказания к применению системной энзимотерапии
10.4. Системная энзимотерапия в комплексном лечении урогенитальных инфекций
10.5. Эффективность системной энзимотерапии в лечении опоясывающего герпеса
10.6. Использование системной энзимотерапии у детей и подростков для лечения заболеваний урогенитального тракта
Глава 11. Лекарственные препараты для терапии герпесвирусных инфекций у взрослых и детей
11.1. Перспективы терапии герпесвирусных инфекций
11.2. Противогерпетические химиопрепараты
11.3. Средства патогенетической терапии
11.4. Иммунотропные средства
11.5. Про- и пребиотики
Глава 12. Индукторы интерферонов — эффективные препараты для терапии вирусных инфекций
Глава 13. Вакцинопрофилактика герпеса
Купить медицинскую литературу по акушерству, гинекологии, дерматовенерологии, офтальмологии, педиатрии, терапии, иммунологии, вирусологии в интернет-магазине медицинской книги shopdon.ru
0 комментариев